🌹🌻🌺ساخت تار عنکبوت در میکروارگانیسم ها 🌻🌹🌺
@biotechnology1

عنکبوت تارهای ابریشمی مختلفی تولید می کنند که به لحاظ چسبندگی،انعطاف پذیری و استحکام تفاوت دارند و به طور کلی برای به دام انداختن طعمه، تشکیل کیسه های تخم و تنیدن طراحی شده است. تارهای قلاب محکم ترین الیاف محسوب می شوند. عنکبوت های درشت از یک تار قلاب در فضا آویزان می مانند انواع تارها از پپتیدهایی ساخته شده اند  که به صورت ورقه های ناموازی آرایش یافته اند و دارای زنجیره ی اسیدآمینه کوتاهی می باشند که فشردگی و میانکنش آب ناپذیر محکمی را ایجاد می نماید.
🌺 @biotechnology1 🌺

گزارش ها از تولید تار عنکبوت در مقیاس وسیع در باکتری اشریشیا کلای مهندسی ژنتیک شده راه را در جهت تولید الیاف جدید با استحکام استثنایی هموار ساخته است. امکان وارد کردن اسیدهای آمینه انتخابی با زنجیره های جانبی واکنشگر متناسب در این تارها با روش های  نوترکیب و تولید آن به وسیله میکروب ها را نشان می دهد که این تارها را می توان به سایر پلیمرها متصل و احتمالا گروه جدیدی از مواد ترکیبی را تهیه نمود.
🌺 @biotechnology1 🌺

سنتز پلی مرهای پروتیینی تار عنکبوت در مخمر پی چیا پاستوریس به میزان بالا از طریق انتقال ژن ساخته شده و بیان گردید. ژن های تار عنکبوت از تکرارهای ترادف  ای نسبتا دراز ، بیش از 300 جفت بازی ، از اولیگونوکلیوتیدهای سنتتیک ساخته شده که پروتیین های با وزن مولکولی بالا 163 کیلودالتون را کد می کند. هر دو نوع پروتیین مشابه در اشریشیاکلای به حد کافی تولید گردیده است.

🌺🌹🌻 تکنیک های لازم برای تهیه کردن کل DNAسلول باکتریایی به وسیله لیز کردن سلول باکتریایی E.Coli 🌺🌻🌹

قسمت اول
🌺 @biotechnology1 🌺

باکتری ها نوع بسیار ساده ای از زندگی را نشان می دهند. آن ها فاقد دیواره سلولی محکم، غشای هسته ای و سازمان ژنتیکی پیچیده می باشند.این موجب شده است که محققین از آن ها به عنوان ارگانیسم مدل استفاده کنند و آزمایش های خود را بر روی آن ها انجام دهند.

برای تحقیق های زیست مولکولی برای مطالعه باکتری ها ,استخراج ماده ی ژنتیک یکی از لازمه ها می باشد. برای استخراج کل DNA خام از سلول باکتریایی با لیز کردن کردن دیواره ی سلولی باکتریایی و همچنین غشای سلولی به هدف خواهیم رسید.

🌺 @biotechnology1 🌺

به علت اینکه باکتری ها فاقد غشای هسته ای هستند، برای لیز سلول از روش های فیزیکی و/یا مواد شیمیایی ممکن است استفاده شود. با خارج سازی DNAسلولی به محیط آبی، می توانید از ژنوم برای تحقیق های ساده ای همچون افزایش یک ژن از طریق PCR، تشخیص ژن مقاومت به آنتی بیوتیک و بسیاری موارد دیگر استفاده کنید.
🌺 @biotechnology1 🌺

اقدامات لیز کردن خیلی زیاد در میکروبیولوژی محیطی و پزشکی استفاده می شود. زمان یک فاکتور خیلی حیاتی در تشخیص بیماری ها و توصیف پتانسیل های پاتوژن همچون مقاومت آنتی بیوتیکی و بیماری زایی می باشد. از این رو به جای پروسه های بسیار طولانی جدا کردن DNA ژنومی یا پلاسمیدی، بسیاری از آزمایشگاه ها ترجیح می دهند برای تشخیص ژن بیشتر از روش لیز کردن باکتریایی استفاده کنند.

🌺 @biotechnology1 🌺

استفاده کردن از لیز باکتریایی به جای روش های مرسوم فایده های بسیاری دارد به این علت که زمان کمتری برای انجام مراحل آن و مهرات کمتری نیاز است. این عمل می تواند در هر شرایط آزمایشگاهی بدون وجود وسایل پیچیده انجام گیرد.

گزارش های بسیاری در رابطه با استفاده از روش لیز باکتریایی برای تشخیص گونه ها به وسیله افزایش ژن 16S rRNA، آنالیز مقاومت آنتی بیوتیکی گونه جدا شده، تشخیص حضور یا عدم حضور ژن بیماری زا در ژنوم باکتریایی و محل اثر آنزیم های محدود کننده، ارایه شده است. پس بنابراین، از طریق لیز باکتریایی، اطلاعات اولیه دقیق و صحیحی می توان نسبت به استفاده از DNA ژنومی و پلاسمیدی باکتریایی که زمان بیشتری مورد نیاز است، بدست آورد.

روش های مختلفی برای لیز کردن سلول E.Coliوجود دارد از جمله :
1) جوشاندن
2) هموژنیشین
3) لیزآنزیماتیکی
4)فریز کردن
5) آسیاب کردن و غیره
@biotechnology1
ترجمه : سعید کارگر

🌺🌹🌻روش لیز کردن باکتری از طریق جوشاندن:

1) کشت E.Coliرا تا حد سوپانسیون 0.5مک فارلند در محیط کشت LB رشد دهید. اگر نیاز بود، کشت رشد یافته را برای رسیدن به سوپانسیون 0.5 مک فارلند رقیق کنید.
2) در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه در 6000 rpmسانتریفیوژ کنید.
3) سوپرناتانت را دور بریزید و دوباره سلول های پلت را در 200 میکرولیتر آن mili-Qاتوکلاو شده suspendکنید.
4) حمام آب را در دمای 100 درجه سانتیگراد تنظیم کنید.
5) لوله سانتریفیوژ شده محتوای کشت باکتریایی را به مدت 10 دقیقه در حمام آب بگذارید.
6) فورا لوله سانتریفیوژ شده را در داخل یخ به مدت 5 دقیقه بگذارید.
7) بعد از انکوبه گذاری در یخ، لوله را در به مدت 5 دقیقه در دمای 4 درجه سانتیگراد در دور 10000 rpmسانتریفیوژ می کنیم.
8) سوپرناتانت را به لوله جدید انتقال دهید و آن را تا زمان استفاده در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.
🌺🌹🌻
@biotechnology1
🌺🌹🌻

آنالیز اسپکتروفتومتری لیز باکتریایی اطلاعات واضحی در مورد مقدار DNA موجود و همچنین کیفیت آن می دهد. از جذب در 260 nmبرای اندازه گیری میزان کیفیت محتوای نوکلیک اسید استفاده می شود.
🌺🌹🌻
@biotechnology1
🌺🌹🌻

ضریب جذب نوری260/280 برای DNAخالص معادل 1.8 و برای RNAخالص معادل 2 می باشد. بنابراین می توان استنتاج کرد که اگر نرخ ضریب جذب نوری260/280کمتر از 1.8باشد حاوی پروتیین و اگر بیشتر 1.8باشد حاوی RNAمی باشد.

🌺🌹🌻 حل مشکلات احتمالی پیش امده برای لیز کردن باکتری ها 🌺🌹🌻 @biotechnology1

Herman is an engineered bull that possesses the gene for human lactoferrin (HLF)

@biotechnology1

HLF confers antibacterial and iron transport properties to humans.

Many of Herman’s offspring now produce milk containing HLF, and biotechnology company intends to build a herd of this engineered cows for large scale production of HLF.

@biotechnology1

The gene codes for luciferase, an enzyme required for bioluminescence, is delivered into cultured tobacco plant cells. @biotechnology1

Plants regenerated from the cultured cells have the ability to glow in dark.

🌻🌹🌺 موازیسم چیست؟ 🌺🌻🌹

@biotechnology1

هر سلول در بدن انسان از یک تخم اولیه به وجود می آید که شروع به تقسیم شدن می کند. همین که سلولهای جدید شکل می گیرند،کروموزوم ها خود را تکثیر می کنند به طوری که سلولهای حاصل دارای همان تعداد کروموزوم به اندازه ی سلول اصلی می باشند.

با این حال گاهی اوقات اشتباهاتی رخ می دهد. در ژنتیک موزاییک (Mosaic) یا موزاییسم به حضور  دو یا تعداد بیشتری جمعیت سلولی با ژنوتیپ های متفاوت در یک جانور که از یک تخم لقاح یافته ناشی شده است، می گویند.
موزاییک می تواند نتیجه مکانیسم های متفاوتی باشد از جمله:
Non-disjunction,
anaphase lag,
endoreplication


@biotechnology1

با رخ دادن این وقایع در مراحل اولیه تقسیم سلولی تخم ، سلول هایی با ژنوتیپ متفاوت ایجاد می شود و پس از آن تمام سلول هایی که از آن مشتق می گیرند، ژنوتیپ متفاوتی خواهند داشت. موزاییسم می تواند به علت رخ دادن جهش در مراحل اولیه تخم لقاح یافته رخ دهد.

موزاییسم مانند سبک موزاییک در هنر که در آن یک تصویر از رنگ های مختلف کاشی ها ساخته می شود. انواع مختلفی از موزاییسم وجود دارد مانند موزاییسم جنسی که فقط به گامت ها محدود می شود و موزاییسم بافتی یا سوماتیکی.
🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺
@biotechnology1
🌺🌺🌺🌺🌺🌺🌺