"Etiology and outcome of extreme neutrophilic leukocytosis: A multi-institutional retrospective study of 269 dogs" - разбор и ключевые моменты статьи.

🌟"Этиология и последствия экстремального нейтрофильного лейкоцитоза: многоцентровое ретроспективное исследование с участием 269 собак"

🟥Экстремальный нейтрофильный лейкоцитоз представляет собой клиническую проблему, поскольку гранулопоэз может неспецифически стимулироваться различными фоновыми патологическими процессами: системное воспаление, различные инфекции, неопластические состояния, аутоиммунные.🟥

🇸🇿Собак отнесли к одной из следующих категорий заболеваний на основании прижизненного или посмертного диагноза: инфекционные/воспалительные (79 собак- 29%), иммуноопосредованные (39 собак - 14%), неопластические (74 собаки - 28%), с повреждением/некрозом тканей (21 собака - 8%), с более чем одним диагнозом (35 собак - 13%) или без диагноза (21 собака - 8%). Собак с диагнозом «острый или хронический миелоидный лейкоз», поставленным на основании морфологического вида бластных клеток в кровотоке, исключали из исследования.

❕Из 269 исследованных собак, у 202 количество палочкоядерных нейтрофилов было выше референсного значения (то есть наблюдался сдвиг влево).
У 61 из 79 собак в группе инфекционные/воспалительные заболевание, было диагностировано подозрение на инфекционное заболевание, а у 58 из 61 подозрение на бактериальное заболевание было подтверждено. У остальных собак был предположительно диагностирован неопластический процесс на основании результатов диагностической визуализации и совокупного клинического заключения с учётом таких факторов, как отрицательный результат теста на инфекционное заболевание.

🔴Выживаемость и исход (дожитие до выписки, эвтаназия, естественная смерть) были связаны с категорией заболевания. Собаки в категориях заболеваний иммуноопосредованные и с повреждением/некрозом тканей имели более высокую вероятность дожить до выписки по сравнению с собаками в категории неопластические. Среди собак с неоперабельными опухолями был самый низкий процент выписанных (43,8 %) и самый высокий процент подвергнутых эвтаназии (50,7 %).

✔Нейтрофильный лейкоцитоз был связан с широким спектром заболеваний. В отличие от медицинской литературы, посвящённой людям, степень нейтрофилии, количество палочкоядерных нейтрофилов или токсические изменения в нейтрофилах не отражали конкретную этиологию.

🟥Инфекционные/воспалительные заболевания были наиболее распространённой категорией в нашем исследовании, и в большинстве случаев речь шла о бактериальных инфекциях.
Второй по распространённости категорией заболеваний была неоплазия. Это согласуется с данными ветеринарной и медицинской литературы, согласно которым опухоли, даже при отсутствии инфекции, связаны с повышенным содержанием нейтрофилов.🟥

Смертность у собак с экстремальным нейтрофильным лейкоцитозом высока, но различается в зависимости от основного заболевания. Выявлены лишь слабые корреляции между клиническими или клинико-патологическими показателями и смертностью.

❕Экстремальный нейтрофильный лейкоцитоз следует рассматривать в контексте основного заболевания, а не использовать для прогнозирования клинического исхода.

Результат прогестерона уже у вас на почте!

🇯🇵Коллеги, с 5 ноября 2025 года наше отделение ИФА гормональной диагностики переходит на ежедневное выполнение анализов (ранее выполнение исследований проводилось в течение 2-3 дней).

🇸🇿Это значит, что все поступившие пробы в лабораторию DuocorLab будут выполнены на следующий день до 16 часов (не более суток с момента поступления пробы в лабораторию)
Пробы которые мы выполняем в нашем отделении:
🔴Т4 общий,
🔘ТТГ собак,
🔴Кортизол (в т.ч. МДП и проба с АКТГ),
🔘Прогестерон,
🔴Тропонин,
Паратгормон (в данный момент исследование в СТОП листе, о возобновлении сообщим отдельно).

Отдельно для прогестерона:
Приём проб ПРОГЕСТЕРОНА для получения результата день в день:
Львовская, 10 (Санкт-Петербург) И Колтушское шоссе, 19 (Всеволожск) - ДО 12:00
Голландская, 23 (Янино) - ДО 15:00

#DuoCor_Lab_новости

Все ли врачи лаборатории просто переписывают цифры или работа устроена несколько сложнее? Давайте посмотрим, как это обстоит в ПЦР-отделе.

Это база💅🏻 В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение специфичного участка нуклеиновой кислоты.

🇯🇵Для проведения ПЦР необходима реакционная смесь, в которую вносится проба, подготовленная определённым образом. В ней может находиться ДНК искомого микроорганизма. Таким образом, если изначально было 2 копии нуклеиновой кислоты, то на втором их будет 4, а на третьем 8.

✔ В результате мы получаем достаточное количество нуклеиновой кислоты для считывания анализатором. Каждое удвоение называется циклом (запомните, это пригодится вам дальше). В ДуоКор.Лаб мы проводим 50 таких циклов.

✖ При отсутствии нужной нуклеиновой кислоты специфический продукт амплификации не образуется: нельзя удвоить то, чего нет.

Здесь вводные понятны? :)

#DuoCor_Lab_микробиология
#DuoCor_Lab_ПЦР

Искомая нуклеиновая кислота в образце есть, как врач ПЦР-отдела фиксирует её накопление?

Следим за руками: анализатор принимает сигнал от специального красителя, который становится интенсивнее при увеличении копий ДНК. То есть больше копий ДНК, больше взаимодействия молекул – сильнее сигнал, воспринимаемый анализатором. По мере накопления копий ДНК увеличивается и сигнал флуоресценции, которую анализатор показывает в виде кривой.

🟥Результатом ПЦР является график🟥

При учёте результатов врач ПЦР анализирует два показателя:
✔Уровень флюоресценции
✔Цикл, на котором график достиг порогового значения (то есть минимально необходимого, чтобы считать положительным)
И только совокупность этих двух признаков даёт достоверный положительный результат!

🇯🇵График обязательно должен достигнуть порогового значения и обязательно должен это сделать до определённого цикла, иначе образец не может считаться. положительным.
Например, бывают графики, которые так и не достигают нужного уровня флюоресценции, или же достигают, но слишком поздно. Оценить причины и принять решение, что делать с такими образцами – тоже задача врача ПЦР.

#DuoCor_Lab_микробиология
#DuoCor_Lab_ПЦР

👁 Важный момент для лабораторный исследований - единицы измерения. И иногда они являются камнем преткновения для клинической оценки лечащим врачом.

🇯🇵 Что же касается ПЦР-исследования вы уже увидели, что как таковых единиц измерения нет, в основном «обнаружено» или «не обнаружено». Конечно, по графику можно оценить, что в некоторых образцах образовалось больше или меньше копий, чем обычно. Даже в рамках нашего короткого обзора вы видели упоминание «высококопийных» и «низкокопийных» образцов.

При обсуждении клинических случаев, мы иногда используем эти данные, они помогают нам и врачам клиницистам принять решение в спорных ситуациях, но всё же наша стандартная методика не является истинно количественной.

🟥Но она может быть таковой. На данный момент в ДуоКор.Лаб мы выполняем лишь одно такое исследование – количественное определение РНК вируса лейкемии кошек, которое позволяет контролировать вирусную нагрузку.🟥

➡ Исследование выполняется с помощью того же оборудования на тех же реагентах, что и привычный ВЛК РНК. С одним нюансом: мы используем калибровочный образец с точно известной концентрацией искомой нуклеиновой кислоты, который и позволяет нам с помощью специальных формул произвести расчёт и выдать количественный результат. В нашем случае этот результат выражается в копиях РНК/мл.

🇸🇿А всего варианта выдачи таких результатов два: по международным рекомендациям вирусная нагрузка измеряется в копиях/мл или МЕ/мл.

#DuoCor_Lab_микробиология
#DuoCor_Lab_ПЦР

Единицы измерения в ИФА исследованиях: отделить зерна от плевел.

Начнем с азов.
В основе метода лежит реакция антигена с соответствующим антителом, в результате чего образуется иммунный комплекс, + добавляется хромогенный субстрат для окрашивания комплексов АТ-АГ. Чем больше иммунных комплексов образовалось, тем интенсивнее будет окрашивание. Интенсивность окрашивания оценивают по величине оптической плотности.
В результате исследования мы получаем оптическую плотность. И уже из неё получаются те результаты, которые видите вы.

‼‼‼ Результаты ИФА можно получить в трех вариантах: количественном, полуколичественном и качественном.

1⃣Результаты качественного анализа получают при сравнении оптической исследуемого образца с пороговым значением оптической плотности. Если оптическая плотность анализируемой пробы больше порогового значения, она считается положительной, если меньше – отрицательной.

2⃣Результаты полуколичественного варианта ИФА рассчитывают по формулам, заданным производителем тест-системы. В бланке с результатами обычно указывают единицы измерения как коэффициент позитивности и другие условные единицы. Иногда такой результат может быть представлен даже в процентах!

🟥Важно понимать, что для каждой тест-системы разрабатываются индивидуальные референтные значения! Если мы ищем разными тест-системами антитела к одному и тому же вирусу методом ИФА и получаем один и тот же результат, например, 5 условных единиц, то в случае одной тест-системы этот результат может быть положительным, а другой – отрицательным!🟥

🇯🇵Это нужно учитывать при оценке результатов каждого конкретного исследования. Некорректно интерпретировать результаты одной лаборатории по референтным значениям другой лаборатории. Тем более не следует сравнивать результаты, полученные в разных лабораториях и на реактивах разных производителей.

🇸🇿Также ошибкой будет принимать полуколичественные результаты за количественные. Про количественные результаты разберем в следующих сериях, не переключайтесь!)
В действительности величина коэффициента зависит от того, насколько много было в образце антител, однако эта зависимость не является линейной, поэтому на основании таких исследований можно оценить динамику выработки антител лишь приблизительно.

#DuoCor_Lab_микробиология
#DuoCor_Lab_ПЦР
#DuoCor_Lab_ИФА

И количественные результаты. Они могут быть представлены в двух видах:

🔘Первый предусматривают наличие в наборе для ИФА калибраторов – реагентов с известной концентрацией исследуемого аналита. После завершения исследования на основании определения оптической плотности калибраторов строится калибровочная кривая, с ней сравнивается оптическая плотность образцов биоматериала и вычисляется содержание в них искомых антител. В отличие от полуколичественного метода результаты выражаются как мг/дл, нг/мл, ЕД/мл, МЕ/мл и так далее. Количественные методы позволяют оценить, много или мало исследуемого соединения содержится в образце при сравнении с референсными интервалами для данного показателя.

🇸🇿В теории количественные результаты позволяют сравнивать результаты, полученные на разных тест-системах, однако для этого должны быть разработаны универсальные калибраторы. Поэтому в реальности для наборов, используемых в ветеринарии, не рекомендуется оценивать динамику роста или снижения антител на разных тест-системах.

🔴Второй вариант количественного результата – титры антител, например 1:200, 1:400 и так далее. За титр антител принимают наибольшее разведение испытуемой сыворотки, при котором значение её оптической плотности равно или превышает значение оптической плотности диагностического уровня. В зависимости от искомых антител, диагностическим считается либо изначально высокий их уровень, либо четырёхкратное и более их увеличение в парных сыворотках.
🟥Между положительными и отрицательными образцами существует «серая зона». Это диапазон значений, в который с равной вероятностью могут попадать как положительные, так и отрицательные пробы. В таких случаях рекомендуется повторить исследование с новым образцом биоматериала, полученного через 2–3 недели или провести подтверждающий тест более чувствительным методом.🟥

В подготовке материала использованы данные из обзора: Москалец О.В. Иммуноферментный анализ в практике клинициста. Клинический разбор в общей медицине. 2022; 6: 19–23. DOI: 10.47407/kr2022.3.6.00171

#DuoCor_Lab_микробиология
#DuoCor_Lab_ПЦР
#DuoCor_Lab_ИФА