❓ Кейс недели: В рамках проведения 3 фазы клинического исследования биоаналога тенектеплазы, рекомбинантного белка для внутривенного болюсного введения, для биоаналитического этапа был выбран оптимальный вариант коммерческой тест-системы ИФА с аналитическим диапазоном 0,156–10,000 нг/мл. Однако ожидаемые значения максимальной концентрации (Cmax), согласно литературным данным, превышают верхний предел количественного определения диапазона на несколько порядков, а также характеризуются высокой межиндивидуальной вариабельностью и быстрой фазой элиминации. Каким образом следует организовать аналитический этап для получения достоверных фармакокинетических данных, соответствующих требованиям регулятора?

🔈 Ответ: При планировании аналитического этапа для препаратов с подобными фармакокинетическими характеристиками следует руководствоваться принципами, изложенными в Решении Совета ЕЭК № 85 и руководстве ICH M10, а именно — применить множественные валидированные разведения для образцов различных временных точек.

➡️ Поскольку ожидаемые значения Cmax могут достигать нескольких тысяч нг/мл и превышать верхнюю границу аналитического диапазона (10 нг/мл), использование единого фактора разведения некорректно. В связи с этим рекомендуется применять дифференцированный подход:

🔘для образцов в области Cmax целесообразно использовать высокие коэффициенты разведения (например, 1:1000);
🔘для образцов с промежуточными концентрациями — разведения 1:100 или 1:8;
🔘 для образцов в фазе элиминации — минимальные разведения, например 1:1;
🔘для образцов до введения препарата анализ проводится без этапа разведения.

‼️ Ключевое условие применения данного подхода — доказательство того, что процедура многократного разведения не вносит систематической ошибки. Возможность использования выбранных коэффициентов разведения должна быть подтверждена на этапе валидации тест-системы производителем, а также в ходе оценки дополнительного валидационного параметра - «линейность разведения образцов» (согласно п. 83 Раздела V Приложения № 6 к Решению Совета ЕЭК № 85). Это подтверждает отсутствие влияния матрицы и «эффекта сползания» ("хук-эффекта"), гарантируя достоверность обратного пересчета концентрации разведенного образца.

📌 Отдельное внимание при проведении аналитического этапа исследования препаратов — биоаналогов человеческого тканевого активатора плазминогена (tPA) — следует уделить вопросу фонового физиологического уровня эндогенного tPA. Детектирование данного явления может быть обусловлено чувствительностью и специфичностью метода. Однако, согласно литературным данным, получаемые значения эндогенного уровня в несколько раз ниже 5% от ожидаемых значений Cmax, в связи с чем обнаружение концентраций в преддозовых образцах не вносит значимой интерференции в результаты фармакокинетического анализа и не влияет на корректность расчета ФК-параметров.

Особенности фармакокинетических характеристик препаратов тенектеплазы представлены в следующих научных публикациях:

🎓1. Tanswell P. et al. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of tenecteplase in fibrinolytic therapy of acute myocardial infarction // Clinical Pharmacokinetics. – 2002. – Vol. 41, № 15. – P. 1229-1245. (PMID: 12452736).

🎓2. Modi N.B. et al. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of tenecteplase: results from a phase II study in patients with acute myocardial infarction // Journal of Clinical Pharmacology. – 2000. – Vol. 40, № 5. – P. 508-515. (PMID: 10806604).

❓ #вопрос относительно трактовки требований п. 18 и 19 Приложения №4 к Решению № 85 о достаточности предоставления данных по анализу проникающей способности действующего вещества на основании литературных данных. Согласно п. 18, допускается представление данных in vivo из опубликованной научной литературы (фармакокинетика, исследования биодоступности). В то же время п. 19 требует анализа проникающей способности in vitro с использованием валидированных методов, включая клеточную линию Caco-2.

В связи с этим просим уточнить, является ли исчерпывающим и достаточным обоснованием высокой проникающей способности предоставление литературных данных только на основе in vivo исследований согласно п. 18 Решения № 85 или, помимо выполнения п. 18 (где допускается приведение информации, из опубликованной научной медицинской литературы) Решения 85 ЕЭК, необходимо исполнение п. 19 Решения № 85, а именно фактическое проведение исследований in vitro? Можно ли в пункте 19 аналогично п. 18 ссылаться только на предоставление литературных данных? Какие критерии следует учитывать при анализе проникающей способности на клетках Caco-2 с учетом имеющихся данных о фармакокинетике у человека?

❗️ #ответ: согласно п. 18 Приложения №4 к Правилам исследования биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза (Решение Совета ЕЭК от 03.11.2016 г. №85) допускается представлять данные in vivo, полученные в результате проведения исследований с участием человека, взятые из опубликованной научной медицинской литературы (например, знания свойств лекарственного препарата и исследования биодоступности); при этом необходимо учитывать, что не все статьи научных рецензируемых журналов (изданий) содержат необходимые данные об исследованиях, чтобы оценить качество этих исследований.

📍 Таким образом, очевидно, что в ряде случаев возможно ограничение представлением только данных литературы.

📍 При отсутствии достаточных литературных данных, анализ проникающей способности действующего вещества также проводится с помощью валидированных и стандартизированных методов исследований in vitro с использованием линии клеток Caco-2.

❓ Кейс недели: Планируется провести регистрацию лекарственного средства вилдаглиптин, таблетки 50 мг, по процедуре «биовейвер», основанной на БКС. Какой подход, в соответствии с Приложением 4 к Решению 85 ЕЭК, является необходимым и достаточным, чтобы подтвердить «высокую» кишечную проницаемость вилдаглиптина?

💙 Благодарим всех, кто принял участие в опросе!

❓ Поскольку мнения разделились, кейс следует разобрать детально.

1️⃣ Возможен ли БКС-биовейвер для таблеток вилдаглиптина?

🎓Ответ: да, возможен, при выполнении работ в объеме из Приложения 4 к Решению 85 ЕЭК. Так, в отчётах уполномоченных органов упомянуто исследование по проведению биовейвера вилдаглиптина, где утверждается, что вилдаглиптин относится к I классу БКС.

Например:  

➡️ Galvus, Xiliarx, INN-vildagliptin – Australian Public Assessment Report for Vildagliptin. URL: Galvus, Xiliarx, INN-vildagliptin (tga.gov.au)

➡️ Vildagliptine Intas 50 mg tablets, INN-vildagliptin - Public Assesment Report. Scientific discussion. URL: https://www.geneesmiddeleninformatiebank.nl/pars/h124950.pdf

2️⃣ Каким образом обосновать «высокую» проницаемость вилдаглиптина?

🎓Ответ: в случае с вилдаглиптином вариантом выбора является обзор литературы по in vivo исследованиям. Так, согласно пункту 18 Приложения 4, допускается представлять данные in vivo, полученные в результате проведения исследований с участием человека, взятые из опубликованной научной медицинской литературы (например, знания свойств лекарственного препарата и исследования биодоступности).

👌При этом необходимо учитывать, что не все статьи научных рецензируемых журналов (изданий) содержат необходимые данные об исследованиях, чтобы оценить качество этих исследований.

📌 Так, в работе The absolute oral bioavailability and population-based pharmacokinetic modelling of a novel dipeptidylpeptidase-IV inhibitor, vildagliptin, in healthy volunteers  приведены следующие данные: были проведены исследования определения абсолютной биодоступности вилдаглиптина при пероральном приеме, путем сравнения системного воздействия после перорального и внутривенного введения у здоровых добровольцев.

🔘Методы: открытое рандомизированное перекрестное исследование с двумя периодами и двумя видами лечения с участием 11 здоровых добровольцев.

🧷Субъекты получали  вилдаглиптин 50 мг перорально или 25 мг в виде 30-минутной внутривенной инфузии дважды, разделенных 72-часовым периодом вымывания.

➡️ Концентрации вилдаглиптина определяли с помощью специального анализа в моче (нижний предел количественного определения = 5 нг/мл) и серийных образцах плазмы - 2 нг/мл), полученных в течение 24 ч после введения дозы. Результат: оценили абсолютную биодоступность вилдаглиптина при пероральном приеме на уровне 85%, что подтверждает его «высокую» проницаемость. 

➡️ В канале регулятора также недавно был представлен комментарий, касающийся предоставления данных литературы для подтверждения проницаемости. Так, исследование на культурах клеток, в том числе Caco 2, являются вариантом выбора только в случае отсутствия достоверных опубликованных данных in vivo.